Метод основан на четко выраженном влиянии стероидных гормонов яичников на органы-мишени, к которым относится и эпителий влагалища. В результате этого во время менструального цикла происходят циклические изменения эпителия (влагалищные циклы), характеризующиеся различной степенью созревания эпителиальных клеток. От стенок влагалища отделяются три типа клеток: парабазальные — мелкие, с диаметром около 15-25 мм, с круглым ядром, происходящие из нижнего (герминативного) слоя, промежуточные — более крупные, с диаметром 25-30 мкм и везикулярным ядром с диаметром около 9 мкм, происходящие из среднего слоя эпителиальных клеток влагалища, и поверхностные, самые крупные, с диаметром около 6 мкм, полигональной формы клетки, которые могут иметь или везикулярное, или пикнотическое ядро (диаметр менее 6 мкм). В последнем случае клетки отражают максимальную степень созревания влагалищного эпителия, которая наблюдается при повышении эстрогенной насыщенности организма.
Количественный анализ соотношения клеток в мазке и их морфологическая характеристика являются основой гормональной цитодиагностики.
Для цитологического исследования материал получают путем аспирации или осторожного прикосновения инструментом к боковой стенке влагалища (не соскабливать слизистую оболочку!): в мазок должны попасть только те клетки, которые свободно отделились от слизистой оболочки влагалища. Взятый материал переносят на предметное стекло, фиксируют и окрашивают. Для окраски чаще используют полихромный метод Шорра (или его модификацию), позволяющий дифференцировать клетки на эозинофильные (красные) и базофильные (синие), и монохромные методы (окраска гематоксилином и эозином или гематоксилином и фуксином).
Окрашенный мазок изучают под микроскопом и производят подсчет клеток (200-300 клеток, лучше из центра мазка). При подсчете клеток определяют три показателя (индекса).
1. ИС (числовой индекс, индекс зрелости) представляет собой процентное отношение трех видов эпителиальных клеток — парабазальных, промежуточных и поверхностных. Записывается в виде трех чисел слева направо: сдвиг влево означает появление парабазальных клеток, свидетельствующих о недостаточности функции яичников, сдвиг вправо — увеличение количества поверхностных клеток, которое свидетельствует о высокой эстрогенной насыщенности организма.
2. КИ — процентное отношение поверхностных клеток с пикнотичными ядрами к общему числу клеток в мазке. Чем больше значение этого индекса, тем выше эстрогенная насыщенность организма.
3. ЭИ — процентное отношение эозинофильно окрашенных поверхностных клеток к общему числу клеток мазка. Так же, как и КИ, служит показателем эстрогенного воздействия. В норме ЭИ всегда ниже КИ, в противном случае эозинофилия имеет негормональное происхождение.
Кроме указанных индексов, учитывают скученность цитоплазмы клеток (по трехбалльной системе), расположение клеток — наличие пластов, или индекс скученности, представляющий собой отношение клеток, находящихся в скоплениях по 5 и более, к клеткам, расположенным раздельно. Эти два показателя характеризуют прогестероновое воздействие.
В мазках могут быть признаки воспалительных изменений, при которых эндокринологическая трактовка невозможна, и цитолиза, которому подвергаются промежуточные клетки в результате воздействия палочек Дедерлейна.
По исследованию влагалищных мазков можно косвенно судить не только о соотношении эстрогенов и гестагенов в организме, но и об гиперандрогении. Андрогенные типы мазка характеризуются сдвигами ИС влево и появлением несколько более крупных, чем парабазальные, округлых клеток, чистым фоном всего мазка, бледной окраской цитоплазмы (атрофический андрогенный мазок). Чаще андрогенное воздействие сочетается с эстрогенным, что проявляется также сдвигом ИС влево, но менее значительным, чем в первом случае, уменьшением значений КИ и ЭИ, загнутыми краями промежуточных клеток (напоминают ладьевидные при беременности), часты цитолитические изменения.
При невозможности проведения кольпоцитологического исследования (воспалительные изменения стенок влагалища, обильные маточные кровотечения) используют уроцитограмму. В этом случае мазок получают из осадка мочи, полученного при центрифугировании. Окраска и оценка мазков такие же, как и влагалищных.
Кольпоцитологические показатели при нормальном менструальном цикле (М ± т), %
Время исследования (дни цикла) |
ИС |
КИ |
ЭИ |
||
Парабазальные клетки |
Промежуточные клетки |
Поверхностные клетки |
|||
4-9 |
Единичные в препарате или отсутствуют |
80,2±7,9 |
19,9±2,4 |
15,3±2,1 |
10,6±1,9 |
10-13 |
0 |
60±6,7 |
40+4,1 |
30±3,6 |
25,5+4 |
14-15-й (овуляция) |
0 |
15±2,1 |
85+9,3 |
80,7+9,3 |
75,4+6 |
16-20 |
0 |
60,5±6,2 |
39,5+5,3 |
30,8+3,9 |
25,6±4,7 |
21-27 |
0 |
80±9,3 |
20+.2.9 |
10,6±2 |
8,8±1,9 |